近年來(lái)，隨著免疫組織化學(xué)技術(shù)的發(fā)展和各種特異性抗體的出現(xiàn)，使許多疑難得到了明確診斷。在常規(guī)病理診斷中，5%-10%的病例單靠H.E.染色難以作出明確的形態(tài)學(xué)診斷。尤其是免疫組化在診斷和鑒別診斷中的實(shí)用價(jià)值受到了普遍的認(rèn)可，其在低分化或未分化的鑒別診斷時(shí)，準(zhǔn)確率可達(dá)50%-75%。
免疫組化操作步驟
⑴、石蠟切片脫蠟至水。
⑵、3%H2O2室溫孵育5-10分鐘，以消除內(nèi)源性過(guò)氧化物酶的活性。
⑶、蒸餾水沖洗，PBS浸泡5分鐘x2（如需抗原修復(fù)，可在此步后進(jìn)行）。
⑷、5-10%正常山羊血清（PBS稀釋?zhuān)┓忾]，室溫孵育10分鐘，傾去血清，勿洗。滴加一抗工作液，37℃孵育1-2小時(shí)或4℃過(guò)夜。
⑸、PBS沖洗，5分鐘x3次。
⑹、滴加適量生物素標(biāo)記二抗工作液，37℃孵育10-30分鐘。
⑺、PBS沖洗，5分鐘x3次。
⑻、滴加適量的辣根酶或堿性磷酸酶標(biāo)記的鏈霉卵白素工作液，37℃孵育10-30分鐘。
⑼、PBS沖洗，5分鐘x3次。
⑽、顯色劑顯色3-15分鐘（DAB或NBT/BCIP）
⑾、自來(lái)水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明，封片。
從免疫組化結(jié)果而言，免疫組化技術(shù)服務(wù)主要涉及抗體免疫組化結(jié)果的描述與分析，圖片的確定與選取，相關(guān)數(shù)據(jù)的提供，上述工作是免疫組化工作的重點(diǎn)內(nèi)容，只有嚴(yán)格的免疫組化設(shè)計(jì)，標(biāo)準(zhǔn)的免疫組化操作，專(zhuān)業(yè)化的結(jié)果分析才能更好的滿(mǎn)足客戶(hù)的要求，這點(diǎn)對(duì)于形式為腹水，上清，培養(yǎng)液之類(lèi)的抗體顯得更為重要。
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